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| pcDU6质粒载体介导的表达TGF-β1 sh RNA的质粒构建 |
| 刘虹;刘伏友;彭佑铭 |
| 中南大学湘雅二医院,湖南,长沙,410002 |
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| Construction of Plasmid Expressing TGF-β1 Sh RNA Mediated by pcDU6 Plasmid Vector |
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摘要 [目的]用pcDU6质粒载体构建介导转化生长因子β1(TGF-β1)短发夹RNA(short hairpin RNA,sh RNA)表达的质粒.[方法]针对TGF-β1的以GGCC开始的21碱基大小的片段,分别设计2对寡核苷酸,形成双链后将其依次连入带有U6启动子的pcDNA3.1(-)载体(命名为pcDU6),两对DNA双链通过BamHⅠ酶切位点连接后形成中间由6个碱基序列间隔的反向互补序列,构建成TGF-β1短发夹RNA的产生质粒.[结果]经酶切、连接后构建成的质粒称之为pcDU6-A1-A2和pcDU6-B1-B2,经酶切与测序证实构建成功,无任何碱基突变.[结论]成功构建了能表达TGF-β1 shRNA的质粒载体pcDU6-A1-A2和pcDU6-B1-B2,可能为临床防治长期腹膜透析病人的腹膜纤维化提供高效的方法.
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| 关键词 ：
转化生长因子β
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收稿日期: 2004-03-20
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