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TNF-α对肠上皮细胞通透性的影响及其NF-κB/MLC-P调控途径的研究 |
龙毅;何芳;尹飞 |
中南大学湘雅医院儿科,湖南 长沙,410008 |
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摘要 [目的]探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对人肠上皮细胞间通透性的影响及作用机制.[方法]利用Caco-2细胞建立肠上皮细胞屏障模型;分为对照组和NF-κB抑制组,分别为转染了空载质粒(vector)和DN-Mu ikBa质粒的Caco-2细胞,两组经TNF-α预处理后,应用电阻仪测定各组跨上皮细胞电阻(TEER)变化,罗丹明-鬼笔环肽直接染色观察细胞骨架改变,同时采用荧光素酶报告基因检测NF-κB活性,免疫印迹法检测肌球蛋白轻链(MLC)磷酸化水平.[结果]TNF-α活化NF-κB,引起F-actin(细胞骨架蛋白)重排,MLC磷酸化水平增高,细胞通透性增加;反之,抑制NF-κB活化,上述作用被明显抑制.[结论]TNF-α导致Caco-2细胞间的通透性增加,其机制可能与NF-κB活化,F-actin重排及MLC磷酸化有关.
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关键词 :
肠,
上皮细胞,
肿瘤坏死因子α,
NF-κB
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收稿日期: 2013-05-20
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