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| 快速检测耐异烟肼结核分支杆菌方法的研究 |
| 程晓东;别良峰;苏明权;张荣;于文彬;郝晓柯 |
| 第四军医大学附属西京医院检验科,陕西,西安,710032 |
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| Study on the Method of Rapidly Detecting Isoniazid-resistant Isolates of Mycobacterium Tuberculosis |
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摘要 [目的]应用多重聚合酶链反应-单链构象多态性分析(multiple-Polymerase Chain Reaction-Single Strand Conformation Polymorphism,multi-PCR-SSCP)方法,快速、特异地同时检出耐异烟肼(isoniazid,INH)结核分支杆菌aphC启动子、inhA、katG基因的突变情况,并与直接测序(derict sequencing,DS)结果相比较,参照药敏试验,探讨该方法的可行性.[方法]根据结核分支杆菌的aphC启动子序列、inhA序列、katG序列,分别设计出3对特异性寡聚核苷酸引物,采用multi-PCR-SSCP技术,同时检测对结核分支杆菌耐INH起作用的这三个基因的突变情况;同时进行耐药株的测序分析.[结果]对H37 Rv标准株、临床分离INH敏感株(23株)及INH耐药株(35株)进行multi-PCR-SSCP分析,突变检出率82.9%(29/35);耐药株测序分析突变栓出率为85.7(30/35).两种方法的符合率为97.1%[(29+5/)/35].[结论]耐药基因检测指导治疗是一种新探索,multi-PCR-SSCP方法敏感、特异,能同时快速有效地检测结核分支杆菌aphC启动子、inhA、katG三个INH耐药基因的突变,提高检验效率,有望成为临床指导用药的好方法.
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| 关键词 ：
分支杆菌,
结核,
药物耐受性,
异烟肿
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收稿日期: 2006-09-20
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