PRS载体介导的表达CTGF-SiRNA逆转录病毒载体的构建
肖力;刘伏友;彭佑铭;袁芳;陈俊香
中南大学湘雅二医院肾内科,湖南,长沙,410002
Construction of Retrovirus Expressing CTGF siRNA Mediated by PRS Retrovirus Vector
摘要 [目的]构建表达人结缔组织生长因子(CTGF)小分子干扰RNA(small interfering RNA,SiRNA)的PRS-CTGF-SiRNA逆转录病毒载体.[方法]根据SiRNA靶序列设计要求及PRS逆转录病毒载体特点分别设计含64 bp DNA序列的4对寡核苷酸,并在体外合成.PRS载体用BgⅡ、HindⅢ双酶切完全后,分别与退火的4对寡核苷酸进行连接,连接后去载体自连,构建成表达人CTGF小分子干扰RNA的PRS-CTGF-SiRNA逆转录病毒载体.[结果]经酶切、连接后构建成的质粒称之为PRS-CTGF-SiRNA1～4,经酶切与测序证实构建成功,无任何碱基突变.[结论]成功构建了能表达人CTGF-SiRNA的PRS-CTGF-SiRNA逆转录病毒载体,为腹膜透析腹膜纤维化防治的体内、外研究提供一种可能有效的方法.
关键词 ：
逆转录病毒科 ,
遗传载体 ,
结缔组织
收稿日期: 2006-10-20
基金资助: 高等学校博士学科点专项科研项目(20040533066)
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