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| HBV preS2真核载体的构建及其表达 |
| 陈熙;李金丽;王鑫;张明;詹利生;万艳平 |
| 南华大学病原生物学研究所,湖南,衡阳,421001;南华大学解剖学教研室,湖南,衡阳,421001;南华大学病原生物学研究所,湖南,衡阳,421001 |
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| Expression and Construction of Hepatitis B Virus PreS2 Eukaryotic Vector |
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摘要 [目的]扩增乙型肝炎病毒(HBV)前S2基因(preS2),并构建其真核表达载体,为研究HBV树突状细胞疫苗奠定实验基础.[方法]从慢性乙型肝炎患者血清中提取HBV DNA,用聚合酶链反应技术扩增全长preS2基因,将其克隆到真核载体pcDNA3.1(+)上,经PCR、酶切和DNA测序鉴定筛选阳性克隆,构建真核表达载体pcDNA3.1(+)-preS2,并将其转染巨噬细胞48 h后,ELISA检测细胞裂解液中preS2的表达.[结果]从慢性乙型肝炎患者血清抽提的DNA中扩增得到约860bp大小的目的片段,preS2基因片段正确插入pcDNA3.1(+)载体,得到HBV preS2真核表达载体pcDNA3.1(+)-pre2.[结论]成功地构建了含preS2基因的真核表达载体pcDNA3.1(+)-preS2,并能在巨噬细胞中表达目的蛋白HBV preS2.
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| 关键词 ：
遗传载体,
肝炎病毒,
乙型/遗传学
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收稿日期: 2006-11-20
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| 基金资助:湖南省医药卫生科研项目(B2005084) |
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