|
|
|
| 用基因免疫方法制备小鼠抗人OAT1多克隆抗体 |
| 许国双;刘安 |
| 第四军医大学西京医院,陕西,西安,710032;西安市儿童医院,陕西,西安,710003 |
|
| Generation of Mouse Anti-Human Organic Anion Transporter 1 Polycional Antibody by Genetic Immunization |
|
|
|
摘要 [目的]用基因免疫方法制备小鼠抗人有机阴离子转运蛋白1(hOAT1)多克隆抗体.[方法]提取人肾组织总RNA,用RT-PCR方法扩增hOAT1基因中免疫源性较强的细胞内亲水序列片段,克隆到载体pBQAP-TT中,鉴定正确后用基因枪与辅助载体pCMVi-GMCSF和pCMVi-FIT3L同时免疫小鼠,12周后ELISA方法测定血清抗体滴度,鉴定抗体的特异性和定位表达.[结果]扩增出207 bp的hOAT1细胞内亲水序列片段,构建的基因免疫载体经酶切及序列分析鉴定正确.Western blot结果显示小鼠抗hOAT1多克隆抗体识别人肾皮质膜蛋白55 kD的hOAT1.免疫组化结果提示hOAT1定位表达在人近端肾小管上皮细胞基底侧细胞膜.[结论]用基因免疫的方法可以成功制备高滴度和特异性抗hOAT1多克隆抗体.
|
|
| 关键词 ：
抗体,
基因/免疫学,
小鼠
|
|
收稿日期: 2007-05-20
|
| [1] |
肖东;刘琪;刘艳;张大权;向东明. 镇静、镇痛对脓毒症小鼠炎性因子及病死率的影响[J]. 医学临床研究, 2014, 31(1): 55-58. |
| [2] |
尤兰华;童春堂;韩春红;李雪辉;郭沛艳;陈杭薇. 新兵流感病毒抗体检测的临床分析[J]. 医学临床研究, 2013, 30(9): 1692-1694. |
| [3] |
龚钰婷;梁玉梅. 肿瘤坏死因子及其单克隆抗体对肾病综合征复发患者糖皮质激素受体表达的影响[J]. 医学临床研究, 2013, 30(5): 841-843. |
| [4] |
刘婷;邵挥戈;黄碧;赵立玲. 脂联素对小鼠主动脉平滑肌细胞体外钙化作用机制的研究[J]. 医学临床研究, 2013, 30(4): 642-644. |
| [5] |
李兴超;张唯哲;宋铭忻;徐佳;俞昭阳. 旋毛虫致小鼠肺脏损伤的研究[J]. 医学临床研究, 2013, 30(4): 660-662,666. |
| [6] |
郑昌荣. 美沙拉嗪治疗强直性脊柱炎的疗效及对患者自身抗体的影响[J]. 医学临床研究, 2013, 30(2): 261-262. |
| [7] |
罗泉芳. 系统性红斑狼疮患者自身抗体、免疫球蛋白及补体的变化及临床意义[J]. 医学临床研究, 2013, 30(2): 269-271. |
| [8] |
铁宁;王勇;张桂枝;赵静;李鸿斌. 抗环胍氨酸肽单链噬菌体抗体库的建立[J]. 医学临床研究, 2013, 30(10): 1873-1877. |
| [9] |
刘娟;吴和英;谭宗建;张红云;张勇. 反复自然流产患者封闭抗体检测及淋巴细胞免疫治疗的临床效果[J]. 医学临床研究, 2012, 29(8): 1488-1490. |
| [10] |
王梦远;李旭宏;何天时;苟剑林. 枯否细胞在昆明小鼠实验性肝癌发生中的作用及机制[J]. 医学临床研究, 2012, 29(7): 1261-1264. |
| [11] |
阳昌军;陶冶;陈伟. 抑制Smac基因表达对胰腺癌裸鼠移植瘤生长影响的研究[J]. 医学临床研究, 2012, 29(5): 925-927,930. |
| [12] |
吴天慧;李志辉;段翠蓉;银燕;寻劢;张翼. 激素敏感型和耐药型肾病综合征患儿血清免疫复合物的水平及其意义[J]. 医学临床研究, 2012, 29(2): 286-289. |
| [13] |
任旭;陈茜;陈小琴. 缺氧诱导因子-1α单克隆抗体治疗SCID小鼠子宫内膜异位病灶的实验研究[J]. 医学临床研究, 2011, 28(8): 1472-1474. |
| [14] |
张辉;钱友良;尚超;宋永胜. Ag85A和GM-CSF DNA疫苗对小鼠原位膀胱癌细胞免疫功能的影响[J]. 医学临床研究, 2011, 28(5): 801-803. |
| [15] |
刘建祥;高双全;何晓燕;陈俊斌. 硫辛酸对急性低氧暴露小鼠C-Fos表达的影响[J]. 医学临床研究, 2011, 28(5): 832-833,836. |
|
|
|
|
