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RhoC调控骨肉瘤侵袭转移分子机制的研究 |
唐朝阳;倪江东 |
中南大学湘雅二医院骨科,湖南,长沙,410011 |
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Molecular Mechanisms of RhoC Inducing Invasion and Metastasis of Osteosarcoma |
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摘要 [目的]探讨RhoC在骨肉瘤发生侵袭转移中的作用和调控的分子机制.[方法]通过细胞培养技术培养不同转移潜能的骨肉瘤细胞株SOSP-9607H9(低侵袭能力组)及SOSP-9607E10(高侵袭能力组),应用RT-PCR和Western-blot方法在mRNA和蛋白水平检测RhoC的表达水平,进一步采用划痕愈合实验比较两种不同骨肉瘤细胞株的侵袭运动能力,分析骨肉瘤细胞侵袭运动能力与RhoC的表达水平的相关性;并通过质粒转染的方法从逆向验证RhoC的高表达调控骨肉瘤细胞的侵袭运动.[结果]两组细胞在开始接种时期无差异.当进入细胞对数生长期后,SOSP-9607 E10细胞增殖能力明显增强.在RhoCmRNA水平,高侵袭转移潜能SOSP-9607E10细胞中目的基因RhoCmRNA的表达高于低侵袭潜能组SOSP-9607H9细胞,差异有显著性(P<0.05);在RhoC蛋白水平,高侵袭转移潜能SOSP-9607E10细胞中目的蛋白RhoC的表达高于低侵袭潜能组SOSP-9607H9细胞,差异有显著性(P<0.05),SOSP-9607E10细胞的划痕愈合能力高于SOSP-9607H9细胞的划痕愈合能力.转染pcDNA3.1-RhoC质粒组SOSP-9607H9细胞中目的基因RhoCmRNA的表达高于转染pcDNA3.1空质粒细胞中RhoCmRNA的表达,差异有显著性(P<0.05).转染pcDNA3.1-RhoC质粒后SOSP-9607E10细胞中目的蛋白RhoC的表达高于转染pcDNA3.1质粒SOSP-9607H9细胞,差异有显著性(P<0.05).[结论]RhoC的差异表达可能是导致骨肉瘤细胞株SOSP-9607H9和SOSP-9607E10具有不同肿瘤细胞生物学行为和不同侵袭运动能力差异的原因之一;RhoC的过量表达在骨肉瘤侵袭转移中发挥关键性作用.
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关键词 :
骨肉瘤
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收稿日期: 2007-10-20
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