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| 人可溶性肿瘤坏死因子受体1基因的克隆、表达及鉴定 |
| 傅蕾;彭仕芳;谭德明;侯周华 |
| 中南大学湘雅医院感染病科,湖南,长沙,410008 |
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| Cloning,expression and identification of human sTNFR1 in E.Coli JM109 |
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摘要 [目的]构建人可溶性肿瘤坏死因子受体1基因的重组质粒,进行原核表达.[方法]以Hela细胞的总RNA为模板,用RT-PCR方法扩增sTNFRl全编码区基因片段,构建舍有目的片段的T载体克隆及原核表达载体pMAL-c2x重组质粒亚克隆,经异丙基-β-D半乳糖苷酶(IPTG)诱导重组质拉菌表达sTNFR1,以淀粉树脂亲和层析法纯化重组蛋白,用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western-blotting对重组蛋白进行分析鉴定.[结果]经核苷酸序列测序和Western-blot鉴定,成功构建了人sTNFR1重组质粒基因工程菌,表达了具有sTNFR1免疫活性的融合蛋白.[结论]构建了人sTNFR1重组质粒克隆,获得了具有sTNFR1的免疫活性的融合蛋白,为今后的研究打下了基础.
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| 关键词 ：
受体,
肿瘤坏死因子/分离和提纯,
基因
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收稿日期: 2007-10-20
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| 基金资助:湖南省自然科学基金(05JJ30178) |
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