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| 骨质疏松患者体外培养BMSCs的生物学特性 |
| 代平;詹瑞森;王卫国 |
| 广东省深圳宝安区福永医院骨科,广东,深圳,518103;中南大学湘雅三医院骨科,湖南,长沙,410013 |
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| Biological Characteristics of Bone Marrow Stromal Cells Obtained from Osteoporotic Patients in vitro |
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摘要 [目的]探讨骨质疏松患者骨髓源骨髓基质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)的体外培养方法和作为种子细胞的可能性.[方法]从一骨质疏松患者髂骨中抽取骨髓10ml,体外培养、传代和扩增,对细胞形态进行观察及采用流式细胞仪鉴定BMSCs;将第三代细胞分别接种在常规DMEM培养液及常规DMEM+10ng/ml(PDGF-BB)培养液,绘制两组的生长曲线、倍增时间及用MTT法分析其存活和增殖能力;将第三代细胞分别用常规DMEM培养液、常规矿化液和常规矿化液+PDGF-BB(10ng/ml)培养液培养,向成骨细胞定向诱导分化后测定三组细胞内碱性磷酸酶(ALP)含量及茜素红法(ARS)钙化结节染色.[结果]倒置相差显微镜下观察显示原代细胞具有成纤维细胞的生长特性;生长曲线显示常规DMEM+PDGF-BB培养液组较常规DMEM培养液组细胞增殖快且细胞倍增时间短;流式细胞仪鉴定细胞群为BMSCs,纯度在95%以上;MTT法显示三组两两之间统计学分析均有显著性差异(P＜0.01);ALP定量测定显示三组之间统计学分析有显著性差异(P＜0.01);茜素红法(ARS)钙化结节染色结果显示常规矿化液组和常规矿化液+PDGF-BB培养液两组均为阳性.[结论]从骨质疏松患者骨髓源中获得的BMSCs,经体外培养、纯化、扩增后可达到组织工程骨所要求的106～107细胞数量级,且其可诱导分化为成骨细胞;PDGF-BB能促进BMSCs的增殖,但不影响其分化成骨能力.
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| 关键词 ：
骨质疏松,
骨髓细胞
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收稿日期: 2007-12-20
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