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| TAT修饰的LIM矿化蛋白3的制备和入胞转导活性的研究 |
| 郑文杰;周跃;李长青;贺伟峰 |
| 第三军医大学新桥医院骨科,重庆,400038;第三军医大学西南医院烧伤研究所,重庆,400038 |
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| Preparation of Recombinant TAT-Modified LMP-3 Fusion Protein and Primary Study of Its Transmembrane Transduction Ability |
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摘要 目的 构建pET43.1a-TAT-LMP-3重组蛋白,观察表达目的融合蛋白TAT- LMP-3对人真皮成纤维细胞目的转导活性.方法 构建hLMP-3和TAT49-57目的融合基因,插入载体pET43.1a,组成pET43.1a-TAT-LMP-3重组表达转化大肠杆菌,IPTG诱导TAT-LMP-3融合蛋白表达,Ni2+-NTA亲和层析柱纯化,将融合蛋白加入培养目的人真皮成纤维细胞共孵育,观察蛋白转导进入细胞目的情况.结果 成功地构建了pET43.1a-TAT-LMP-3重组基因原核表达载体,表达和纯化了融合蛋白TAT-LMP-3,在体外培养目的人真皮成纤维细胞中证实TAT-LMP-3融合蛋白目的穿膜转导具有浓度和时间依赖性.结论 成功进行了TAT-LMP-3融合蛋白目的原核表达、纯化和鉴定,初步验证了TAT-LMP-3目的穿膜转导能力,为应用TAT-LMP-3融合蛋白治疗脊柱融合目的实验研究奠定了基础.
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| 关键词 ：
基因产物,
tat,
膜蛋白质类/生物合成
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收稿日期: 2008-04-20
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