前列腺癌细胞DU145同步化诱导的DNA损伤反应通路和PI3KAkt通路对凋亡抑制因子基因Apollon(BIRC6) mRNA表达的影响
彭佑共;杨罗艳;金鹏;吴洪涛;易路;欧阳时锋
中南大学湘雅二医院,泌尿外科,湖南长沙,410011
Study on the effect of DNA damage Response Pathway and PI3K/Akt Pathway Induced by Synchronous Culture of Prostate Cancer Cells DU145 on mRNA Expression of Apollon(BIRC6)
摘要 [目的] 探讨在前列腺癌细胞DU145同步化培养后引起的DNA损伤反应通路和PI3K/AKT通路对凋亡抑制因子(IAP)基因Apollon/BIRC6 mRNA表达的影响.同时分析Apollon基因所在染色体是否存在特异性的异常.[方法]采用无血清的饥饿培养法使细胞同步在G0期;用含羞草碱、胸腺嘧啶和噻氨酯哒唑分别使细胞同步在G1期、S期和G2/M期并引起DNA损伤反应,同时加入PI3K的特异性抑制剂ly294002以阻止PI3K/AKT通路.利用RT-PCR半定量法检测Apollon mRNA在各个细胞周期相的表达情况.细胞遗传学的常规G式显带法,分析凋亡抑制因子基因所在的染色体是否存在特异性的异常.[结果]含羞草碱同步化的G0/G1期细胞达到了78.04%,胸腺嘧啶同步化的S期细胞达到62.19%,噻氨酯哒唑同步化的G2/M 60.5%.Apollon基因所在的染色体2p,存在缺失或者重复,如2p-,2p+.Apollon mRNA的表达, 同步化的G2/M、S期细胞组分别与非同步化细胞组比较差异有显著性(P<0.01),噻氨酯哒唑+ly294002组与噻氨酯哒唑相比较差异有显著性(P<0.01).[结论]前列腺癌细胞株DU145存在某些染色体的结构和数目异常,可能影响某些基因的表达.药物的同步化激活了DNA损伤反应通路和生存信号通路,再通过PI3K/Akt通路,在细胞周期的某个时相调控BIRC6/Apollon mRNA的表达.
关键词 ：
前列腺肿瘤/病理学 ,
DNA损伤 ,
脱噬作用 ,
抑制因子 ,
免疫 ,
RNA
收稿日期: 2009-01-20
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