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| 大鼠骨髓间充质干细胞的分离培养纯化及生物学特性的鉴定 |
| 卓文利;付云烽;徐廷昭;吴卫真;杨顺良;谭建明 |
| 南京军区福州总医院泌尿外科,福建,福州,350025 |
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| Isolation,Culture and Purification of Bone Marrow-derived Mesenchymal Stem Cells in SD rats and Identification of Its Biological Characteristics |
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摘要 [目的]探讨大鼠骨髓间充质干细胞(rat bone marrow-derived mesenchymal stem cells,rBMSCs)体外分离、培养和纯化方法,鉴定其生物学特性,为BMSCs应用奠定技术基础.[方法]采用密度梯度离心法结合贴壁分离法分离培养纯化SD大鼠BMSCs,观察其形态,测定细胞生长曲线,流式细胞仪检测细胞表面标记,成骨诱导试剂盒检测rBMSCs向成骨细胞分化的潜能.[结果]显微镜下rBMSCs呈梭形、多角形成纤维细胞样形态,大小均一,漩涡状生长.生长曲线分析rBMSCs贴壁2 d基本无增殖,处于潜伏期,对数增殖期为3～7 d,d8后进入平台期,细胞出现接触抑制现象.rBMSCs表面标志显示第3代rBMSCs纯度可达97%以上,CD44、CD90呈阳性表达,CD34呈阴性表达;向成骨诱导rBMSCs 10 d后细胞表现成骨细胞特性,碱性磷酸酶活性明显升高.[结论]本实验建立了一种理想的体外分离扩增纯化rBMSCs的培养体系.实验结果表明所分离培养的rBMSCs纯度高、生物学特征稳定,适用于对BMSCs进一步的应用研究.
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| 关键词 ：
干细胞,
骨髓细胞/细胞学,
大鼠
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收稿日期: 2009-03-20
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| 基金资助:福建省青年人才基金(2008F3090)%中国博士后科学基金(20080441333) |
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