慢病毒介导的RNA干扰沉默CRBP-1对大鼠HSCs培养激活的影响
陈波;吴志勇;张志奇;赵刚;戴途;竺来法;金慧涵
南京医科大学附属无锡第二人民医院肝胆外科,江苏,无锡,214002;上海交通大学附属仁济医院普通外科,上海,200127
Effect of Silencing Cellular Retinol-binding Protein-1 Mediated by Lentivirus with RNA Interference on Culure-activated Rat Hepatic Stellate Cells
摘要 [目的]研究慢病毒介导短发卡RNA(shRNA)对大鼠肝星状细胞(HSC)视黄醇结合蛋白-1(CRBP-1)基因表达的抑制作用及对HSCs培养激活的影响.[方法]以胶原酶原位灌注消化和Nycodenz梯度离心法从SD大鼠分离HSCs,携带CRBP-1短发卡核糖核酸慢病毒载体(Lv-shCRBP-1)在体外转染HSCs,设正常对照组和阴性对照组,应用Real time PCR检测CRBp-1、α-SMA基因的表达情况,Western blot检测α-SMA蛋白的表达.[结果]Real time PCR检测显示CRBP-1、α-SMA mRNA的表达转染组较正常对照组和阴性对照组明显降低(均P<0.05),Western blot检测显示α-SMA蛋白表达转染组较其它两组分别下调65.6%,69.5%.[结论]Lv-shCRBP-1可以有效地抑制大鼠,HSCs中CRBP-1和α-SMA的mRNA表达,下调α-SMA蛋白表达,抑制HSCs培养的激活.
关键词 :
肝/细胞学 ,
星形细胞 ,
RNA
收稿日期: 2009-10-20
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