|
|
|
| miRNA-192慢病毒表达载体构建及其抗高糖刺激氧化损伤作用 |
| 李洁;周平;胡秀梅;彭佑铭 |
| 湖南省株洲一医院肾病内科,湖南,株洲,412000;中南大学湘雅二医院肾病内科,湖南,长沙,410011 |
|
| Construction of Lentivirus Expression Vector of MiRNA-192 and Its Action Against Oxidative Damage Stimulated by High Glucose |
|
|
|
摘要 [目的]构建miRNA-192慢病毒过表达载体,并初步评价其在糖尿病肾病中的潜在作用.[方法]检测人肾系膜细胞(HMC)中miRNA-192的含量,以判断载体过表达miRNA-192的程度.采用不同浓度高糖刺激过表达miRNA-192的HMC,检测细胞中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)和超氧化物歧化酶(SOD)活性,评价其过表达拮抗高糖刺激的损伤作用.[结果]酶切和DNA测序证实miRNA-192基因序列被正确克隆入pTLOX载体并能有效的包装成病毒颗粒;病毒滴度达4×107 TU/mL,实时定量RT-PCR检测显示其过表达水平相对对照载体组达376倍,证明目的基因已在转染细胞中成功表达.不同浓度高糖处理组中GSH-PX和SOD活性均比正常对照组下降(P<0.01).[结论]成功构建了miRNA-192病毒过表达载体和高滴度病毒颗粒,并能有效稳定感染HMC;过表达miRNA-192能改善高糖对GSH-PX和SOD活性的抑制作用,拮抗高糖对HMC的氧化应激损伤.
|
|
| 关键词 ：
遗传载体
|
|
收稿日期: 2012-05-20
|
| [1] |
姜武忠;何凤姣;蒋文娟;叶祥兆;黄芬玲;符佳;李立;杨丁懿. 鼻咽癌放射敏感性自杀基因载体的构建[J]. 医学临床研究, 2010, 27(9): 1637-1639. |
| [2] |
付荣泉;盛吉芳;丁继光;吴金国;洪亮;孙庆丰;方辉. 靶向转化生长因子β1的siRNA真核表达载体的构建及鉴定[J]. 医学临床研究, 2010, 27(11): 2007-2010. |
| [3] |
黄纯海;李学军;周异曾;罗勇;田志;袁贤瑞. 人EGFL7基因真核表达载体构建及鉴定[J]. 医学临床研究, 2010, 27(1): 32-35. |
| [4] |
蒋碧梅;何淑雅;苏娇;王桂良;王海云;肖献忠. 核仁素的蛋白质-RNA杂交体系诱饵载体的构建及表达[J]. 医学临床研究, 2007, 24(3): 353-356. |
| [5] |
杨宏辉;蒲晓群;杨天伦;张赛丹;李传昶. 血管内皮生长因子质粒载体的构建[J]. 医学临床研究, 2007, 24(2): 307-308. |
| [6] |
陈熙;李金丽;王鑫;张明;詹利生;万艳平. HBV preS2真核载体的构建及其表达[J]. 医学临床研究, 2006, 23(11): 1709-1711. |
| [7] |
肖力;刘伏友;彭佑铭;袁芳;陈俊香. PRS载体介导的表达CTGF-SiRNA逆转录病毒载体的构建[J]. 医学临床研究, 2006, 23(10): 1524-1526,1531. |
|
|
|
|
